J9九游会

欢迎来到上海J9九游会信息科技有限公司网站!
新闻详情
首页 > 新闻中心 > 3分钟看懂维生素D检测试剂盒的操作步骤

3分钟看懂维生素D检测试剂盒的操作步骤

点一下2次:46发布的期限:2021-03-03
 
  维生素AD查重微生物培养基盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人维生素D(VD)获抗体的包被微孔中, 依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体, 经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色, TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人维*生素D(VD)正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值), 计算样品浓度。
 
  维生素D检测试剂盒的操作步骤:
 
  1)使用前, 将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫, 以免加样时加入大量的气泡, 产生加样上的误差。
 
  2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定, 能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
 
  3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板, 轻轻振荡混匀, 37℃温育1小时。
 
  4)甩去孔内液体, 每孔加满洗涤液, 振荡30秒, 甩去洗涤液, 用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤, 洗涤次数增加一次。
 
  5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP, 轻轻振荡混匀, 37℃温育30分钟。
 
  6)甩去孔内液体, 每孔加满洗涤液, 振荡30秒, 甩去洗涤液, 用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤, 洗涤次数增加一次。
 
  7)每孔加入底物A、B各50ul, 轻轻振荡混匀, 37℃温育10分钟。避免光照。
 
  8)取出酶标板, 迅速加入50ul终止液, 加入终止液后应立即测定结果。
 
  9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
Copyright © 2022 上海J9九游会信息科技有限公司(0755ymtech.com) 版权所有
   sitemap.xml   技术支持: